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化妝品安全性評價試驗方法:皮膚變態反應試驗(一)

2022-07-08 11:38:25
化妝品安全性評價試驗方法:皮膚變態反應試驗(一)

  化妝品安全性評價試驗方法中的皮膚變態反應試驗分為:皮膚變態反應試驗、皮膚光青和光變態反應試驗、皮膚光變態反應試驗。
 

皮膚變態反應試驗

  皮膚變態反應是指通過重復接觸某種物質后機體產生免疫傳遞的皮膚反應。化學

  物質引起的變態性接觸性皮炎,屬IV型(即延遲型)變態反應,在人類的反應可能.

  是瘙癢、紅斑、丘疹、水皰或大皰,動物僅見皮膚紅斑和水腫。
 

試驗方法的原則

  由于接觸致敏的發病過程致敏(誘導)和激發兩個階段,動物在* 次接觸受試物后至少1周,再次給予激發接觸。通過激發接觸能否引起皮膚反應確有無致敏作用。

  實驗*動物為白色豚鼠,每組動物數10~25只。

  豚鼠*大值試驗(皮內和涂皮結合法,簡稱GPMT )
 

  從頭部向尾部成對地做三次皮內注射。(1) 注射0.1mlFCA; (2) 注射0.1ml受試物; (3)注 0.1ml受試物與FCA的等量混合物。如圖1所示,各點間距1. 5cm。
 

  注射后第8天,用2cmX 4cm濾紙涂以用適當賦形劑(花生油、凡士林、羊毛脂等)配制的受試物,將其貼敷在上背部的注射部位,持續封閉固定48小時,作為第二次致敏。為加強致敏作用,對無皮膚刺激作用的化學物質,可在第二次致敏前24小時,在注射部位涂抹10%十二烷基硫酸鈉(SLS)。對照組僅用溶劑或賦形劑注射或涂抹。
 

  激發接觸,即在末次致敏后14~28天,分別用2cmX 2cm的濾紙涂以受試物,再次貼敷在上背部兩側的去毛區,持續封閉和固定24小時。對照動物作同樣處理。

  激發接觸后,24、28和72小時觀察反應,按表6進行皮膚反應強度評分。
 

局部封閉涂皮法(Buehlertest簡稱BT)

  實驗前24小時,用脫毛劑將豚鼠背部左側3cmX 3cm范圍區脫毛。
 

  將受試物0. 1~0.2ml涂在2cmX 2cm濾紙上,并將其敷貼在去毛區,二層紗布一層油紙覆蓋,再以無刺激膠布封閉固定,持續6小時。第7天和第14天以同樣方法重復一欠。
 

  激發接觸,即末次致敏后14~28天,將0.1~0. 2ml或低于誘導濃度的受試物斑貼于豚鼠背部左側2cmX2cm去毛區(接觸前24小時脫毛),然后用二層紗布、一層油紙和無刺激膠布固定6小時,將斑貼受試物拿掉, 24和48小時后觀察皮膚反應,按表5評分。
 

  對照動物僅給了激發接觸。

  木試驗要求動物數每組10~20只。

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